Ce este Crispr-cas9? Mecanismul, tehnica și semnificația denumirii
În acest articol
CRISPR-Cas9 este un instrument derivat dintr-un sistem de apărare dezvoltat de bacterii împotriva virusurilor, care permite tăierea DNA în punctul dorit. Contrar afirmației frecvente, nu a fost descoperit în 2013 — acela este anul primei funcționări a sistemului în celule umane. Iar astăzi nu mai este doar o tehnică de laborator: din 16 noiembrie 2023 există un medicament aprobat.
Acest articol face trei lucruri. Mai întâi corectează, cu surse, șapte erori răspândite în sursele turcești, de la data descoperirii și rolul fiecărei enzime până la traducerea abrevierii. Apoi explică funcționarea sistemului, inclusiv componentele omise: RNA ghid, secvența PAM și repararea după tăiere — unde are loc de fapt „editarea”. În al treilea rând pune întrebarea esențială pentru oncologie: Unde se află CRISPR în tratamentul cancerului?
Să răspundem de la început acestei ultime întrebări, deoarece este punctul cel mai greșit înțeles: În prezent, nu există niciun tratament CRISPR aprobat pentru cancer. Casgevy, singurul medicament CRISPR aprobat, este pentru anemia falciformă și beta-talasemie, ambele necanceroase. Toate programele CRISPR oncologice sunt încă în faza 1 sau faza 1-2. Aceasta nu înseamnă eșecul domeniului, ci că așteptările pacientului trebuie aliniate realității actuale , aceasta fiind semnificația.
Mai întâi șapte corecturi
| Afirmația răspândită | Varianta corectă |
|---|---|
| "descoperit în 2013 CRISPR-Cas9" | Greșit. Secvențele repetate au fost observate întâmplător în 1987 de Yoshizumi Ishino și echipa sa în E. coli. Abrevierea a fost stabilită în 2001–2002 . Funcția imunitară a fost propusă în 2005 și demonstrată experimental în martie 2007 prin aceste cercetări. 2013 este anul primei utilizări a sistemului pentru editare genomică în celule umane — nu anul descoperirii. |
| "enzima Cas9 scanează și taie fragmente de DNA viral. Bacteria adaugă aceste fragmente în propriul genom și formează memorie." | Mecanismul este confundat. Formarea memoriei este realizată de Cas1 și Cas2, nu de Cas9 (în sistemele de tip II participă și Csn2). Rolul Cas9 este numai în etapa de intervenție (interference). În plus, ordinea este inversată: mai întâi se înscrie memoria (la primul contact), tăierea urmează după aceea (la reinfecție). |
| "DNA HIV a fost eliminat din celule umane folosind CRISPR cu succes" | Prea categoric. În laborator, DNA HIV integrat poate fi tăiat. Însă în studiul cu EBT-101 de fază 1/2 (prezentat în mai 2024), dintre cinci participanți, la cei care au întrerupt tratamentul, virusul a revenit la toți cei trei și s-a reluat tratamentul antiretroviral. Tratamentul a fost considerat sigur, dar nu a vindecat pe nimeni. |
| "În experimentele pe șoareci cu atrofie musculară mutația a fost corectată, s-au născut pui sănătoși" | Această afirmație nu a putut fi verificată pentru articol și este înșelătoare deoarece sugerează editare ereditară (germinală). A fost eliminată din text. |
| "CRISPR = grupuri de repetiții palindromice la intervale regulate, divizate în acest mod" | Traducerea conține două erori. „Interspaced” nu înseamnă divizate , ci separate la intervale regulate prin alte secvențe ; în plus, „Short” (scurte) a fost omis. Echivalentul mai fidel: „Repetiții palindromice scurte, grupate și intercalate regulat.” |
| "Cas = CRISPR-associated system" | Când este vorba despre enzimă, dezvoltarea corectă este "CRISPR-associated protein"— Cas9 = proteină asociată CRISPR 9. Expresia „CRISPR-associated system” descrie familia de gene/locusuri. |
| În articol, RNA ghid, secvența PAM și căile de reparare nu sunt menționate deloc | Acestea reprezintă chiar principiul de funcționare al sistemului. RNA ghid stabilește ținta, PAM permite tăierea, iar „editarea” propriu-zisă are loc în repararea de după tăiere . CRISPR nu poate fi explicat fără aceste trei elemente; sunt abordate mai jos separat. |
Cronologia corectă
Mecanism: ce se întâmplă în realitate în bacterie?
CRISPR este un sistem imunitar și, ca orice sistem imunitar, funcționează în trei etape : memorare, pregătire, atac. Sursele turcești comprimă frecvent aceste trei etape într-o singură propoziție și atribuie enzimei greșite rolul greșit.
| Etapă | Ce se întâmplă? | Ce proteine? |
|---|---|---|
| 1. Achiziție (adaptare) Înscrierea memoriei |
La prima infecție, un fragment scurt este prelevat din DNA invadatorului și introdus ca spacer nou între două repetiții din secvența CRISPR în acest loc. | Cas1 și Cas2 (în tipul II participă și Csn2). Cas1 este integrază. Singurul rol al Cas9 aici este de a ajuta la selectarea fragmentelor vecine PAM. |
| 2. Expresie (producerea crRNA) Pregătire |
Secvența CRISPR este copiată într-un pre-crRNA lung și procesată în molecule scurte, fiecare cu un singur spacer, de crRNAastfel maturate. | În tipul II, un RNA mic separat, tracrRNA , se împerechează cu regiunea repetitivă; RNase III taie și eliberează crRNA matur. |
| 3. Intervenție (interference) Atac |
La reinfecție, complexul încărcat cu crRNA circulă în celulă, caută PAM, deschide DNA și împerechează spacerul cu protospacerulcorespunzător; dacă există potrivire, taie ambele lanțuri. | Cas9 — și numai în această etapă. |
Figura 1 · Cele trei etape ale imunității CRISPR
Bacteria înscrie mai întâi memoria, apoi produce ghidul și abia la final taie. Cas9, care realizează tăierea, nu are legătură cu înscrierea memoriei.
Diferența dintre spacer și protospacer: Spacereste secvența preluată de la străin și stocată între repetițiile propriei secvențe CRISPR bacteriene — adică înregistrarea memoriei. Protospacereste secvența originală corespunzătoare din genomul fagului sau plasmidei — adică ținta. Cele două descriu aceeași secvență, dar una se află în memorie, cealaltă în inamic.
Cele trei componente ale instrumentului: RNA ghid, PAM și tăierea
RNA ghid
| crRNA | Ghid matur derivat dintr-un spacer, de aproximativ 20 de nucleotide . Se împerechează prin baze cu protospacerul țintă. |
|---|---|
| tracrRNA | Un RNA mic separat, complementar regiunii repetitive. În sistemele de tip II este necesar atât maturării crRNA, cât și încărcării sale în Cas9. Grupul Charpentier, martie 2011. |
| sgRNA (RNA ghid unic) |
Forma de crRNA și tracrRNA fuzionate într-o singură moleculă prin inginerie. Acesta este pasul care transformă un sistem imunitar bacterian într-un instrument programabil — Jinek, Chylinski, Charpentier și Doudna, 2012. |
PAM: siguranța sistemului
PAM (protospacer adjacent motif)este un motiv DNA scurt care trebuie să existe imediat lângă secvența țintă. Streptococcus pyogenes Pentru Cas9 al acestei specii, PAM standard este 5'-NGG-3'(N = orice bază). În genomul uman, secvența NGG se găsește aproximativ la fiecare 8–12 baze— de aceea majoritatea genelor pot fi țintite.
Fără PAM, Cas9 nu taie. Recunoașterea PAM este primul pas care permite deschiderea DNA și începerea împerecherii bazelor.
Funcția cea mai elegantă a PAM este prevenirea tăierii propriei bacterii. Lângă spacerii secvenței CRISPR bacteriene nu există PAM; lângă protospacerii genomului fagului există. Astfel, același crRNA care distruge fagul nu poate ținti înregistrarea memoriei bacteriei. Problema distincției dintre „propriu” și „străin” a unui sistem imunitar este rezolvată printr-un motiv de două-trei baze. Natura a împiedicat autoimunitatea printr-un semn de punctuație.
Unde și cum are loc tăierea?
Cas9 produce ruptura dublului lanț cu 3 perechi de baze în amonte de PAM . Funcționează două domenii nucleazice separate: HNH taie lanțul împerecheat cu crRNA, RuvC taie lanțul opus. Aproximativ %85 dintre rupturi au capete boante (blunt), iar restul sunt ușor decalate.
„Editarea” propriu-zisă are loc după tăiere
Eroarea conceptuală frecventă este aceasta: CRISPR nu face „taie și lipește”. CRISPR doar taie. Ceea ce stabilește rezultatul, inactivarea sau corectarea genei, este propriul mecanism de reparare al celulei. Există două căi, iar cea care funcționează depinde în mare parte de starea celulei, pe care nu o controlați.
| NHEJ (unirea neomoloagă a capetelor) | HDR (reparare bazată pe omologie) | |
|---|---|---|
| Este necesar un șablon? | Nu | Da — cromatida soră sau DNA donor introdus din exterior |
| Precizie | Predispusă la erori; lasă frecvent mici inserții/deleții (indel) în secvență | Deoarece folosește șablon, fără erori |
| Rezultat | Indel care nu este multiplu de trei → decalarea cadrului de citire → codon stop prematur → inactivarea genei (knockout) | Corectarea mutației punctiforme sau introducerea unei secvențe noi |
| Când funcționează? | În ciclul celular, în fiecare etapă, inclusiv în celule care nu se divid | În principal în fazele S și G2 — adică numai în celulele care se divid activ |
| În celula care nu se divide (neuron, mușchi) | Funcționează | Practic inutilizabilă |
Figura 2 · Două căi de reparare după tăiere
CRISPR doar taie. Calea de reparare folosită de celulă stabilește dacă rezultatul este inactivarea sau corectarea genei.
Acest tabel explică cea mai mare limitare tehnică a domeniului. O genă este ușor de deteriorat — NHEJ funcționează peste tot. O genă este mult mai greu de corectat deoarece HDR intervine numai în celulele care se divid și într-o anumită fereastră a ciclului celular; în plus, concurează cu NHEJ pentru aceeași ruptură. De aceea, majoritatea terapiilor CRISPR ajunse până acum în clinică se bazează pe „oprirea unui lucru”, nu „corectarea unui lucru” — inclusiv Casgevy. Importanța localizării mutației în genă abordată în articolul nostru funcționează aici invers: corectarea unei mutații este mult mai dificilă decât recunoașterea ei.
Cas9 nu este singura opțiune
| Enzimă | Țintă | PAM | Tăiere | Caracteristică |
|---|---|---|---|---|
| Cas9 (S. pyogenes) | DNA | 5'-NGG-3', pe partea 3' | Ruptură a dublului lanț cu capete boante | Standard; necesită crRNA + tracrRNA (sau sgRNA) |
| Cas12a (Cpf1) | DNA | 5'-TTTV-3', pe partea 5' | Decalată, cu capete coezive | Deschide accesul la ținte bogate în AT; nu necesită tracrRNA, își procesează propriul pre-crRNA |
| Cas13 | RNA | Nu are PAM DNA | Tăiere RNA | Inactivare RNA, editare RNA și teste diagnostice |
| SaCas9 (S. aureus) | DNA | — | Ruptură a dublului lanț | Încape în vectorul viral deoarece este mic; se folosește unde SpCas9 nu încape |
Cum se introduce în celulă? Ex vivo și in vivo
Distincția ex vivo / in vivo din articolul original este corectă, dar incompletă: ceea ce contează de fapt este ce transportor este folosit.
| Transportor | Unde | Utilizare | Notă |
|---|---|---|---|
| Electroporare RNP (proteină Cas9 + RNA ghid preasamblate) |
În cultura celulară | Standardul de aur ex vivo — celule stem sanguine și celule T | Efectul cel mai rapid, durata cea mai scurtă, cel mai redus risc în afara țintei |
| Nanoparticulă lipidică (LNP) | La administrare intravenoasă, în principal în ficat | Principala cale in vivo nevirală | Transportă mRNA sau RNP; expresie temporară |
| AAV | Direcționat spre țesut (ochi, sistem nervos, mușchi) | In vivo | Limita de ambalare ~4,7 kb — de aceea sunt necesare Cas9 mici sau soluții cu vectori dubli |
| Lentivirus | Se integrează în genomul gazdei | În principal ex vivo — producerea celulelor stem și CAR-T | Asigură expresie permanentă |
Casgevy: primul medicament CRISPR aprobat din lume
Această secțiune abordează un subiect absent din articolul original, dar care reprezintă cea mai importantă evoluție a domeniului. Casgevy (substanță activă exagamglogene autotemcel, pe scurt exa-cel) a fost dezvoltat de Vertex Pharmaceuticals și CRISPR Therapeutics.
| Data | Autoritatea | Decizia |
|---|---|---|
| 16 noiembrie 2023 | MHRA din Regatul Unit | Prima terapie CRISPR/Cas9 autorizată în lume. Anemie falciformă și beta-talasemie dependentă de transfuzii, de la 12 ani |
| 8 decembrie 2023 | FDA din SUA | Cu crize vaso-ocluzive recurente, anemie falciformă, de la 12 ani |
| 16 ianuarie 2024 | FDA din SUA | Beta-talasemie dependentă de transfuzii, de la 12 ani |
| 13 februarie 2024 | Comisia Europeană | Autorizație condiționată, ambele indicații, de la 12 ani |
| 1 iulie 2026 | FDA din SUA | Limita de vârstă a fost coborâtă la 2 ani — pentru ambele indicații |
Aprobările MHRA și UE sunt limitate la pacienții eligibili pentru transplant de celule stem și fără donor înrudit compatibil HLA pentru transplant.
Cum funcționează? Se recoltează propriile celule stem sanguine CD34+ ale pacientului și, în laborator, prin CRISPR/Cas9 se editează regiunea amplificatoare (enhancer) specifică eritroidă a genei BCL11A . În mod normal, BCL11A inhibă hemoglobina fetală (HbF) ; când inhibarea este eliminată, celulele reîncep să producă HbF. Hemoglobina fetală nu se falciformizează și înlocuiește beta-globina adultă defectuoasă; de aceea aceeași editare funcționează atât în anemia falciformă, cât și în beta-talasemie.
Atenție: gena defectă nu este corectată. În schimb, o altă genă, oprită după naștere, este repornită. Aceasta este consecința directă a limitării NHEJ–HDR explicate mai sus: oprirea este mai ușoară decât corectarea.
Figura 3 · Casgevy nu repară gena defectă — repornește o altă genă
Gena beta-globinei, defectuoasă în anemia falciformă, nu este atinsă deloc. În schimb, hemoglobina fetală, oprită după naștere, este repusă în funcțiune.
| Studiu | Pacienți | Rezultat |
|---|---|---|
| CLIMB-121 anemie falciformă severă |
35 de pacienți tratați, 17 evaluabili | 16/17 (%94,1) cel puțin 12 luni consecutive fără crize vaso-ocluzive; 17/17 (%100) cel puțin 12 luni fără internări din cauza crizelor. Durata medie fără crize 18,7 luni (maximum 36,5). HbF a depășit %30 din total în luna 3, apoi ~%40. |
| CLIMB-111 beta-talasemie dependentă de transfuzii |
48 de pacienți tratați, 27 evaluabili | 24/27 (%88,9) cel puțin 12 luni consecutive fără transfuzii, Hb medie ponderată ≥9 g/dL. Durata medie 20,5 luni (maximum 40,7). Hb totală ≥11 în luna 3, ≥12 g/dL începând din luna 6. |
Urmărirea în cele două studii s-a extins până la 43,7 luni . La toți pacienții celulele s-au grefat și nu a fost raportată nicio malignitate. Profilul de siguranță a fost descris ca „în concordanță cu regimul de condiționare mieloablativă cu busulfan și transplantul autolog de celule stem”.
Dar aceste cifre sunt înșelătoare fără a explica procesul trăit de pacient. Casgevy nu este o pastilă sau o perfuzie, ci un proces de transplant de celule stem:
(1) Medicament de mobilizare și recoltare de celule stem prin afereză — până la o săptămână, repetată dacă este necesar. (2) Producerea celulelor în afara centrului și testele de eliberare — până la șase luni. (3) Câteva zile în spital pentru chimioterapia de condiționare cu busulfan. (4) O singură perfuzie intravenoasă. (5) După perfuzie, 4–6 săptămâni de spitalizare. Riscurile precoce sunt hemoragia și infecția din cauza trombocitelor și leucocitelor scăzute. Iar formularea producătorului în informația pentru pacient este: „După administrarea medicamentului de condiționare, este posibil să nu mai puteți rămâne însărcinată sau deveni tată.”
Prețul de listă din SUA este de 2,2 milioane de dolari. Pentru cadrul general al dezbaterii despre acces și prețuri puteți consulta articolele noastre despre prețurile medicamentelor oncologice și harta accesului la medicamente noi în acest sens. Situația autorizării și rambursării Casgevy în Turcia nu a putut fi verificată pentru acest articol; nu se face nicio afirmație despre acest subiect.
Generația următoare: editarea de baze și editarea prime
Problema fundamentală a Cas9 este producerea rupturii dublului lanț — din care provine cea mai mare parte a riscului, după cum veți vedea în secțiunea de siguranță. Laboratorul lui David Liu a dezvoltat două metode pentru a depăși această problemă.
| CRISPR-Cas9 | Editare de baze | Editare prime | |
|---|---|---|---|
| Tipul rupturii | Ruptură a dublului lanț | Crestătură într-un singur lanț | Fără ruptură a dublului lanț |
| Ce poate face | Taie și lasă repararea celulei | C→T și A→G tranziții (nu poate face transversii) | Toate cele 12 schimbări de baze, plus mici inserții și deleții |
| Necesită DNA șablon | Da, pentru HDR | Nu | Nu |
| Publicare | 2012–2013 | Laboratorul Liu (anii exacți nu au putut fi verificați) | Anzalone și colaboratorii, Nature, 2019 |
Și cazul cel mai remarcabil al domeniului: KJ Muldoon. Un sugar cu deficit sever de carbamoil-fosfat sintetază 1 (CPS1) — tulburare a ciclului ureei, acumulare toxică de amoniac în sânge. La Children's Hospital of Philadelphia și Penn Medicine, s-a administrat un tratament proiectat special pentru varianta sa prin editare de baze, direcționat spre ficat cu nanoparticule lipidice.
Prima doză a fost administrată în februarie 2025, la aproximativ 6–7 luni; încă două doze au urmat în martie și aprilie 2025. Durata de la identificarea variantei până la producție a fost sub șase luni. Până în aprilie 2025 nu au apărut reacții adverse grave, sugarul tolera mai multe proteine, necesarul de medicamente scăzuse și a depășit o infecție virală fără creșterea amoniacului. New England Journal of Medicine, 15 mai 2025.
Importanța acestui lucru depășește mult ameliorarea unui singur pacient: cazul a arătat că un tratament poate fi pentru o singură persoană proiectat și produs în câteva luni. Modelul actual de dezvoltare a medicamentelor este imposibil economic pentru mutațiile rare; acest model îl poate schimba. Însă aceasta este o aplicare experimentală, nu un produs aprobat.
CRISPR și cancerul: unde ne aflăm în realitate?
Articolul original menționează cancerul printre domeniile unde „CRISPR este considerat o abordare revoluționară”. Este corect, dar incomplet. Situația concretă este:
Primul studiu CRISPR oncologic american (Pennsylvania, 2020)
| Numărul pacienților | 3 (cancer avansat) |
|---|---|
| Ce s-a făcut | În celulele T, trei gene au fost inactivate — TRAC și TRBC (lanțurile propriului receptor al celulei T) și PDCD1 (PD-1); apoi, prin vector lentiviral, un TCR sintetic specific NY-ESO-1 a fost adăugat |
| Siguranță | Nu s-au observat evenimente adverse grave legate de tratament |
| Persistență | Celulele editate au persistat luni întregi — mai mult decât fusese documentat; la un pacient, în luna 4, ~%20 dintre celulele T circulante păstrau încă mai multe editări |
| Eficacitate | Fără răspuns obiectiv. Boală stabilă la doi pacienți, răspuns mixt la unul (reducere ~%50 în unele leziuni timp de ~4 luni, celelalte au progresat). Până la finalul studiului, toți au progresat și un pacient a murit. |
Valoarea studiului constă în mesajul de siguranță, nu în efectul terapeutic. S-a demonstrat că celulele T cu trei gene editate simultan pot persista luni în organismul uman fără toxicitate gravă. Dar nu au micșorat tumora. Este important să păstrăm distincția: „CRISPR a fost testat în cancer și considerat sigur” este corect; „CRISPR a tratat cancerul” este greșit.
CAR-T alogen: cea mai realistă aplicare oncologică a CRISPR
Forma actuală a terapiei CAR-T este autologă: propriile celule T sunt recoltate, modificate prin inginerie și reintroduse. Procesul durează săptămâni și este scump. Alogen înseamnă CAR-T produs de la un donor sănătos și utilizabil de pe raft — dar celulele T ale donorului atacă țesutul pacientului. CRISPR este folosit pentru rezolvarea acestei probleme: genele receptorului celulei T și compatibilității tisulare sunt inactivate.
| Numărul pacienților | 12, la patru niveluri de doză (30, 100, 300, 600 ×10⁶ celule CAR+ T) |
|---|---|
| Boli | Malignități cu celule B recidivate/refractare: limfom folicular, de zonă marginală, cu celule de manta, cu celule B mari |
| Rata răspunsului global | 8/12 (%67) |
| Răspuns complet | 6/12 (%50) |
| Durata răspunsului | Un răspuns complet a depășit 12 luni; cinci răspunsuri au durat peste 6 luni |
| Toxicitate | Fără toxicitate limitantă de doză; fără infecții de grad 3 sau peste. Sindrom de eliberare a citokinelor la 7/12, numai grad 1–2; ICANS la 4/12, numai grad 1–2; nu s-a observat GvHD |
| Reglementare | FDA a acordat, la 9 decembrie 2024, pentru limfomul folicular și de zonă marginală, RMAT ca statut |
Datele sunt promițătoare, dar provin dintr-o fază 1 cu 12 pacienți. Răspunsurile la diferite niveluri de doză și absența GvHD sunt semnificative; lipsesc însă datele despre durabilitate, siguranța pe termen lung și comparația cu CAR-T autolog. Am abordat eforturile de aplicare CAR-T în tumorile solide în articolele despre CAR-T B7-H3 în glioblastom și tratamentele țintite B7-H3 în acest context.
În laborator: screeninguri CRISPR și ținte noi
Cea mai mare contribuție de până acum a CRISPR în oncologie ar putea fi nu tratamentul, ci descoperirea țintelor . În screeningurile knockout CRISPR la nivel genomic, mii de gene sunt inactivate individual pentru a măsura fără ce genă nu poate supraviețui fiecare celulă canceroasă.
Exemplul canonic al acestei abordări este helicaza WRN. Naturea publicat în 2019 studiul care arată că tumorile cu instabilitate microsatelitară (MSI) depind de helicaza WRN, iar celulele fără MSI nu depind. WRN este astfel o țintă selectiv letală într-un grup molecular definit — pentru cancerele cu MSI, colorectale, endometriale și gastrice. Această țintă a rezultat dintr-un ecran de screening, nu de la pacienți. Am discutat descoperirea de medicamente asistată de inteligență artificială în articolul Virtual Biotech ; screeningurile CRISPR reprezintă corespondentul experimental al acelei direcții.
Siguranță: secțiunea sinceră
Riscurile CRISPR sunt reduse frecvent în prezentările populare la „tăiere în afara țintei”. Însă o parte a problemelor documentate apar chiar la țintă — adică tăierea locului corect creează ea însăși risc.
| Problemă | Sursă | Ce s-a găsit? |
|---|---|---|
| Problema p53 | Haapaniemi și colaboratorii, Nature Medicine, 11 iunie 2018 | Tăierea Cas9 declanșează un răspuns la leziunea DNA mediat de p53 și oprirea ciclului celular. Concluzia este neliniștitoare: celulele cel mai ușor de editat sunt cele cu calea p53 deteriorată. Deoarece p53 este un supresor tumoral fundamental, autorii au recomandat explicit ca în dezvoltarea terapiilor celulare CRISPR să fie monitorizată funcția p53 în acest scop. |
| Deleții mari și rearanjări complexe | Kosicki, Tomberg, Bradley, Nature Biotechnology 2018;36:765–771 | Rupturile dublului lanț produse de Cas9 pot genera deleții de kilobaze și rearanjări complexe — care la genotiparea prin PCR standard cu rază scurtă trec neobservate. |
| Cromotripsis | Nature Genetics 2021 | Fragmentarea și reunirea greșită a cromozomului (fenomen asociat genomurilor canceroase) a fost raportată ca o consecință a tăierii Cas9 la țintă, nu în afara țintei în aceste cercetări. |
Acestea nu înseamnă că CRISPR nu trebuie folosit, ci că trebuie să înțelegem trei lucruri.
Primul: Cea mai mare parte a riscului provine din ruptura dublului lanț . Absența rupturii în editarea de baze și prime reprezintă un avantaj teoretic de siguranță — de aceea domeniul se îndreaptă acolo.
Al doilea: Datele clinice sunt deocamdată încurajatoare. În studiile Casgevy, nu a fost raportată nicio malignitate în urmărirea de până la 43,7 luni; studiul oncologic Penn nu a avut evenimente adverse grave legate de tratament. Dar pentru întrebarea riscului de cancer aceasta este o urmărire scurtă — iar busulfanul din regimul de condiționare are el însuși un risc cunoscut de malignitate secundară.
Al treilea: Consecințele clinice documentate ale tăierii în afara țintei și poziția oficială a autorităților despre riscul oncologic pe termen lung al terapiilor celulare editate nu au putut fi verificate pentru acest articol. Aceasta nu înseamnă „nu există risc”, ci „această întrebare nu a primit încă răspuns” ca afirmație.
He Jiankui și interdicția editării ereditare
| 26 noiembrie 2018 | He Jiankui anunță nașterea unor fete gemene cu genomuri editate prin CRISPR. Gena țintă este CCR5; scopul este rezistența la HIV. |
|---|---|
| Reacție | 122 de oameni de știință chinezi publică o declarație numind studiul „neetic” și „nebunesc”. Laureatul Nobel care prezidează summitul din Hong Kong, David Baltimore exprimă „groază și tristețe”; comitetul organizator califică procedura la 28 noiembrie drept „iresponsabilă” și încălcare a normelor internaționale. Criticile privesc consimțământul informat insuficient, riscurile nedezvăluite și lipsa evaluării de specialitate. |
| 30 decembrie 2019 | Tribunalul Popular Shenzhen Nanshan îl condamnă pentru practică medicală ilegală: trei ani de închisoare și amendă de 3 milioane de yuani. Doi colaboratori primesc doi ani și 18 luni. |
| Aprilie 2022 | Este eliberat după executarea pedepsei. |
| Astăzi | Organizația Mondială a Sănătății, prin comitetul de experți înființat în 2018, a concluzionat că editarea ereditară a genomului uman este încă prea riscantă și nu trebuie practicată în prezent. Chinaa modificat Codul Civil și Codul Penal în 2020, interzicând editarea genelor umane în scop reproductiv și majorând pedeapsa până la șapte ani. |
Acest eveniment oferă o lecție și pentru oncologie. Ceea ce a făcut He Jiankui nu era dificil tehnic — costul mic și ușurința CRISPR erau tocmai calitățile sale cele mai lăudate. Bariera se afla în instituții, nu în tehnică; iar aceste instituții au putut fi ocolite de o singură persoană. Toate terapiile celulare editate oferite astăzi pacienților oncologici sunt somatice— adică afectează numai persoana respectivă, fără transmitere generațiilor următoare. Distincția trebuie clarificată obligatoriu cu pacientul: CAR-T sau un tratament similar nu schimbă genomul copiilor dumneavoastră.
Nobel și brevet: a cui este invenția?
Premiul Nobel pentru Chimie 2020a fost acordat în părți egale lui Emmanuelle Charpentier și Jennifer A. Doudna, „pentru dezvoltarea unei metode de editare a genomului” . Limitarea premiului la trei persoane a lăsat în afară numeroși contribuitori și a creat dezbateri.
| Cine | Contribuția |
|---|---|
| Feng Zhang | A făcut CRISPR-Cas9 să funcționeze în celule umane (3 ianuarie 2013). Preferința Academiei pentru știința fundamentală față de cea aplicată a fost interpretată ca un „mesaj major” pe fundalul disputei de brevete SUA–UE. |
| Virginijus Šikšnys | A ajuns la același rezultat biochimic; articolul său a fost trimis înainte de cel al lui Jinek și colaboratorilor, dar a fost publicat după, deoarece fusese respins fără recenzare. Împărțise Premiul Kavli pentru Nanoștiință 2018 cu Doudna și Charpentier. |
| Francisco Mojica | A dat numele CRISPR și a propus funcția imunitară (2005) |
| Rodolphe Barrangou, Philippe Horvath | Au demonstrat experimental funcția (2007) |
Textele critice documentate privind excluderea lui Mojica, Barrangou și Horvath nu au putut fi verificate pentru acest articol; datele contribuțiilor au fost verificate. Pentru mai multe despre procesul Nobel puteți consulta articolul nostru despre Premiul Nobel pentru Chimie 2020 în acest sens.
Disputa brevetelor nu s-a încheiat încă. Partea Berkeley (CVC) a depus cererea la 25 mai 2012, iar Broad Institute la 12 decembrie 2012 ; prin evaluare accelerată, Broad a obținut în aprilie 2014 primul brevet. Comisia Americană de Apel pentru Brevete a decis la 15 februarie 2017 și la 28 februarie 2022 în favoarea Broad. Însă la 12 mai 2025, Curtea Federală de Apela analizat evaluarea comisiei privind „formarea ideii invenției”, a anulat decizia și a retrimis dosarul: fusese folosit un criteriu juridic greșit. Criteriul corect este dacă invenția era „suficient de completă pentru ca specialiștii competenți să o poată aplica fără o invenție suplimentară”. Problema priorității nu este încă soluționată astăzi.
Comentariul DROZDOGAN Akademi
La actualizarea acestui articol, lucrul cel mai remarcabil a fost că informațiile de corectat erau învechite și prea optimiste, nu greșite . Un text CRISPR scris în 2018–2020 nu poate include cea mai importantă evoluție: existența unui medicament aprobat. Dar nu arată nici cea mai importantă limită a domeniului: încă nu există o terapie CRISPR aprobată pentru cancer.
⚡ De ce contează
Fiindcă pacienții oncologici și apropiații aud despre CRISPR și întreabă justificat: „Este o opțiune pentru mine?” Răspunsul sincer actual este nu — dar încă nu. Cea mai realistă aplicare oncologică este editarea de către CRISPR nu a tumorii, ci a celulei imunitare : CAR-T alogen. Răspunsul de %67 și absența GvHD în faza 1 CTX112 cu 12 pacienți reprezintă un semnal semnificativ; dar 12 pacienți rămân 12 pacienți.
✅ Punctul forte
Casgevy a demonstrat că editarea genică este acum un produs autorizat, nu o promisiune — iar cifrele sunt bune: în anemia falciformă, 16/17 pacienți fără crize peste un an, în talasemie, 24/27 pacienți independenți de transfuzii. Nu s-a raportat malignitate la urmărirea de până la 43,7 luni. Și mai impresionant este cazul KJ Muldoon: un tratament conceput în mai puțin de șase luni pentru un singur sugar. Aceasta este o dovadă care ar putea reconstrui economia dezvoltării medicamentelor pentru boli rare.
⚠️ Punctul slab
Trei aspecte. Biologia: CRISPR a ușurat tăierea, nu corectarea — HDR funcționează doar în celule care se divid, de aceea majoritatea terapiilor clinice sunt „opriri”, nu „corectări”; chiar Casgevy nu repară gena defectă, ci oprește o altă genă. Siguranța: Selecția p53, delețiile de kilobaze și cromotripsisul sunt probleme la țintă , iar întrebarea riscului oncologic pe termen lung rămâne fără răspuns. Accesul: Preț de listă de 2,2 milioane de dolari, producție până la șase luni, condiționare cu busulfan, 4–6 săptămâni în spital și risc de infertilitate permanentă — nu este o pastilă, ci un proces de transplant.
🩺 Ce trebuie spus pacientului
(1) Astăzi nu există o terapie CRISPR aprobată pentru cancer; toate programele oncologice sunt în cercetare. (2) Participarea la un studiu clinic nu este identică primirii unui tratament aprobat; obiectivul principal al fazei 1 este siguranța, nu micșorarea tumorii. (3) Editarea somatică nu se transmite generațiilor următoare — un tratament de tip CAR-T nu schimbă genomul copiilor dumneavoastră. (4) Priviți cu extremă prudență centrele neautorizate și contra cost care promit „tratament oncologic cu CRISPR”; astăzi nu există un asemenea serviciu aprobat. (5) Progresul real este în hematologie și boli rare; poate fi un semn pentru cancer, dar nu o garanție.
❓ Întrebări deschise
Terapiile celulare editate au, după zece ani, risc de malignitate secundară? Pentru răspuns, cea mai lungă urmărire disponibilă este de 43,7 luni, iar riscul propriu al condiționării confundă variabila. A doua întrebare: editarea de baze și prime reduce cu adevărat riscul eliminând ruptura dublului lanț sau creează doar un profil diferit de risc? A treia, cea mai critică pentru oncologie: poate CAR-T alogen să fie la fel de eficient ca CAR-T autolog? Avantajul de cost și acces al produsului disponibil pe raft ar putea fi valoros chiar cu o mică pierdere de eficacitate — dar acest compromis nu a fost încă măsurat.
Concluzie: Povestea CRISPR a început în 1987 cu câteva secvențe repetitive neînțelese de nimeni și a ajuns în 2023 la un medicament autorizat — treizeci și șase de ani. Intervalul arată cât de lent funcționează cuvântul „revoluție”. Astăzi avem un tratament care funcționează cu adevărat pentru două boli sanguine ereditare, o aplicare experimentală concepută în câteva luni pentru un sugar și date oncologice încurajatoare, dar foarte timpurii, de fază 1. Formularea corectă nu este „CRISPR va învinge cancerul”, ci „CRISPR ar putea funcționa editând celula care atacă cancerul, nu celula canceroasă”, iar dovada provine deocamdată de la 12 pacienți. Din memoria înscrisă de bacterii împotriva virusurilor a rezultat un medicament; ar putea rezulta și pentru cancer, dar încă nu a rezultat.
Întrebări frecvente
- Când a fost descoperit CRISPR?
- Secvențele repetitive au fost observate în 1987 întâmplător, abrevierea a fost stabilită în 2001–2002 , funcția imunitară a fost propusă în 2005 și demonstrată în 2007 , ca foarfecă programabilă a fost prezentat în 2012 , iar în celule umane, la 3 ianuarie 2013 a fost pus în funcțiune. Afirmația frecventă „descoperit în 2013” este greșită.
- Ce înseamnă CRISPR?
- Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats — „Repetiții palindromice scurte, grupate și intercalate regulat”. Traducerea frecventă „divizate” este greșită: „interspaced” înseamnă că repetițiile sunt separate prin alte secvențe între ele. Cas înseamnă, când este vorba de enzimă, „CRISPR-associated protein” (proteină asociată CRISPR).
- Ce este PAM și de ce contează?
- Este un motiv DNA scurt care trebuie să existe imediat lângă secvența țintă; pentru S. pyogenes și Cas9 al acestei specii, 5'-NGG-3'. Fără PAM, Cas9 nu taie. Funcția cea mai elegantă, datorită absenței PAM lângă înregistrările propriei secvențe CRISPR bacteriene, este prevenirea tăierii propriei bacterii.
- CRISPR face într-adevăr „taie și lipește”?
- Nu — CRISPR doar taie. Rezultatul este stabilit de propriul mecanism de reparare al celulei. NHEJ nu folosește șablon, este predispus la erori și inactivează de obicei gena; HDR folosește șablon și poate corecta, dar funcționează numai în celulele care se divid, într-o anumită fereastră a ciclului celular. De aceea, „deteriorarea unei gene” este ușoară, „corectarea unei gene” este dificilă.
- Există un medicament CRISPR aprobat?
- Da, unul: Casgevy (exagamglogene autotemcel). Regatul Unit: 16 noiembrie 2023, SUA: 8 decembrie 2023 (anemie falciformă) și 16 ianuarie 2024 (beta-talasemie), Europa: 13 februarie 2024. În SUA, la 1 iulie 2026 limita de vârstă a fost coborâtă la 2 ani.
- Există o terapie CRISPR aprobată pentru cancer?
- Nu. Toate programele oncologice CRISPR sunt în faza 1 sau faza 1-2. Domeniul cel mai promițător îl reprezintă celulele produse cu CRISPR, CAR-T alogene ; în studiul de fază 1 CTX112 cu 12 pacienți s-au raportat %67 răspuns global și %50 răspuns complet, iar FDA, la 9 decembrie 2024, a acordat statutul RMAT. Nu este aprobare, ci statut de accelerare a dezvoltării.
- A fost tratat HIV prin CRISPR?
- Nu. În laborator se poate tăia DNA HIV integrat. Însă în studiul cu EBT-101 de fază 1/2, la cei trei participanți care au întrerupt antiretroviralele, virusul a revenit la toți trei și tratamentul a fost reluat — unul a menținut suprimarea 16 săptămâni. Tratamentul a fost considerat sigur, dar nu a vindecat pe nimeni; cauza este imposibilitatea de a ajunge la toate celulele cu HIV latent.
- Tratamentul CRISPR se transmite copiilor mei?
- Nu. Toate tratamentele actuale de editare genică administrate pacienților sunt somatice — afectează numai celulele corporale ale persoanei tratate și nu se transmit generațiilor următoare. Editarea celulelor reproductive (ereditară) este considerată prea riscantă de Organizația Mondială a Sănătății și interzisă în multe țări, inclusiv China.
- CRISPR provoacă cancer?
- Aceasta este o întrebare deschisă, iar răspunsul sincer este „încă nu se știe”. Există trei îngrijorări documentate: tăierea Cas9 selectează celulele cu calea p53 deteriorată (2018), poate produce deleții de kilobaze (2018), iar cromotripsisul a fost raportat ca rezultat la țintă (2021). În schimb, datele clinice sunt deocamdată încurajatoare: în studiile Casgevy nu s-a raportat malignitate până la 43,7 luni de urmărire. Totuși, pentru întrebarea riscului de cancer, aceasta este o perioadă scurtă.
- Editarea de baze diferă de CRISPR?
- Folosește același sistem de țintire, dar nu produce ruptură a dublului lanț: prin crestarea unui singur lanț face conversia C→T sau A→G. Editarea prime poate realiza toate cele 12 schimbări de baze și mici inserții-deleții fără nicio ruptură. Deoarece majoritatea riscului provine din ruptura dublului lanț, aceste metode sunt teoretic mai sigure.
Glosar
- CRISPR
- Secvențe repetitive palindromice scurte din genomul bacteriilor și arheelor, separate prin fragmente DNA străine. Reprezintă memoria unui sistem imunitar adaptativ.
- Cas9
- Proteină asociată CRISPR 9. Este o endonuclează DNA ghidată de RNA; participă numai în etapa de intervenție.
- Cas1 / Cas2
- Proteine responsabile de adăugarea spacerilor noi în secvența CRISPR, adică înscrierea memoriei. Cas1 este integrază.
- Spacer
- Secvență preluată de la străin și păstrată între repetițiile secvenței CRISPR bacteriene. Înregistrare a memoriei.
- Protospacer
- Secvența originală corespunzătoare spacerului din genomul fagului sau plasmidei. Ținta.
- PAM
- Protospacer adjacent motif. Motiv scurt obligatoriu imediat lângă țintă; pentru S. pyogenes și Cas9 al său, 5'-NGG-3'. Este condiția tăierii.
- crRNA
- RNA ghid de aproximativ 20 de nucleotide derivat dintr-un spacer.
- tracrRNA
- RNA mic separat necesar maturării crRNA și încărcării sale în Cas9 în sistemele de tip II.
- sgRNA
- Forma în care crRNA și tracrRNA sunt fuzionate într-o moleculă. Pasul de inginerie care transformă CRISPR într-un instrument programabil.
- NHEJ
- Unirea neomoloagă a capetelor. Reparare fără șablon, predispusă la erori; lasă mici indeluri și inactivează de obicei gena.
- HDR
- Reparare bazată pe omologie. Folosește șablon, este fără erori, dar funcționează în principal în celule care se divid.
- Indel
- Inserție sau deleție mică. Dacă nu este multiplu de trei, produce decalarea cadrului de citire.
- Ex vivo
- Recoltarea celulelor din corp și reintroducerea după editare.
- In vivo
- Administrarea directă a componentelor de editare în organismul pacientului.
- Editare de baze
- Metodă care convertește o singură bază fără ruptura dublului lanț (C→T, A→G).
- Editare prime
- Sistem „caută și înlocuiește” care înscrie direct informație genetică nouă fără ruptură și DNA donor.
- CAR-T alogen
- CAR-T produs de la un donor sănătos, nu din celulele proprii ale pacientului. CRISPR este folosit pentru inactivarea genelor care împiedică atacul celulelor donorului asupra pacientului.
- RMAT
- Regenerative Medicine Advanced Therapy. Statut FDA de accelerare a dezvoltării produselor de medicină regenerativă; nu reprezintă aprobare.
- Cromotripsis
- Fragmentarea unui cromozom și reunirea în ordine greșită. Fenomen observat în genomurile canceroase.
Notă de transparență.
Verificate: Observația lui Ishino din 1987 și organismul; studiile lui Mojica din 1993–2000; stabilirea abrevierii în 2001–2002 și identificarea cas1–cas4; demonstrarea potrivirii spacer–fag de către trei grupuri în 2005 și ipoteza imunitară Mojica; dovada experimentală Barrangou–Horvath din martie 2007; Marraffini–Sontheimer 2008; constatarea Moineau privind locul tăierii din decembrie 2010; descoperirea tracrRNA de grupul Charpentier în martie 2011; Jinek și colaboratorii, Science referința 337:816–821 și fuziunea sgRNA; Gasiunas–Šikšnys, PNAS 4 septembrie 2012 și istoricul respingerii din 18 aprilie 2012; publicațiile simultane Zhang și Church din 3 ianuarie 2013 și proporția %2–38 din articolul Church; Scienceși alegerea din 18 decembrie 2015, precum și cele două clasări secunde; mecanismul în trei etape, separarea rolurilor Cas1/Cas2/Csn2 și Cas9, definițiile spacer–protospacer; definițiile crRNA/tracrRNA/sgRNA; secvența PAM, frecvența genomică și prevenirea autotăierii; tăierea cu 3 baze în amonte de PAM, împărțirea rolurilor HNH/RuvC și %85 rupturi boante; proprietățile NHEJ și HDR și restricția S/G2 a HDR; proprietățile Cas12a, Cas13 și SaCas9; căile de transport și limita AAV ~4,7 kb; cele cinci decizii de reglementare Casgevy și datele lor, mecanismul amplificatorului eritroid BCL11A, rezultatele CLIMB-121 și CLIMB-111, urmărirea de 43,7 luni și absența malignității, etapele procesului pacientului, avertismentul de infertilitate și prețul american de 2,2 milioane de dolari; referința Anzalone 2019 pentru editarea prime și originea editării de baze în laboratorul Liu; diagnosticul, instituțiile, datele dozelor, producția în mai puțin de șase luni a cazului KJ Muldoon și publicația din 15 mai 2025, NEJM ; proiectarea studiului Penn de fază 1, cele trei gene, trei pacienți și absența răspunsului obiectiv; datele CTX112 de fază 1 și data RMAT 9 decembrie 2024; Haapaniemi 2018 p53, Kosicki 2018 deleții mari și constatarea cromotripsisului din 2021; rezultatele EBT-101 faza 1/2; WRN/MSI, Nature constatarea din 2019; datele evenimentului He Jiankui, condamnarea și eliberarea, declarația celor 122 de cercetători și reacția Baltimore; referința Nobel 2020 și motivarea oficială; Premiul Kavli 2018 al lui Šikšnys; datele litigiului de brevete și decizia Federală de Apel din 12 mai 2025.
Neverificate: Datele publicării online și trimiterii articolului Jinek și colaboratorii; Scienceși cei doi ani în care a clasat CRISPR al doilea; referința completă Barrangou–Horvath 2007; dacă abrevierea a fost convenită în 2001 sau 2002 (ambele sunt relatate); criticile documentate privind excluderea de la Nobel a lui Mojica, Barrangou și Horvath; raportul eficienței NHEJ–HDR; anii primelor publicații despre editarea de baze; referința articolului Ihry și colaboratorii 2018 p53; consecințele clinice documentate ale tăierii în afara țintei; poziția oficială a autorităților privind riscul oncologic pe termen lung al terapiilor celulare editate; datele CTX110 și CTX130; programele oncologice Caribou, Intellia și Beam (inclusiv BEAM-201); detaliile proiectului DepMap; prețul Casgevy în afara SUA și numărul pacienților tratați până acum; gena țintă NTLA-2001; referințele exacte ale documentelor de guvernanță DSÖ din 2021; autorizarea și rambursarea Casgevy în Turcia și existența studiilor clinice CRISPR în Turcia — nu s-a făcut nicio afirmație despre acestea. Afirmația originală „în experimentele pe șoareci atrofia musculară a fost corectată, s-au născut pui sănătoși” nu a fost inclusă deoarece nu a putut fi verificată și sugerează editare ereditară.
Sursa criticilor: Evaluările că „2013 este anul aplicării, nu descoperirii”, „CRISPR doar taie, nu taie și lipește”, „majoritatea terapiilor clinice opresc, fiindcă oprirea este mai ușoară decât corectarea”, „Casgevy este un proces de transplant, nu o pastilă” și „în cancer, formularea corectă este editarea celulei care atacă tumora, nu a tumorii” aparțin acestui articol. În schimb, avertismentul despre selecția p53, formulările proprii EMA și FDA, absența răspunsului în studiul Penn și constatarea cromotripsisului sunt formulările surselor înseși.
Declarație de interese: Nu avem legături cu niciun medicament, produs sau companie menționată în articol.
Surse
- Ishino Y, Shinagawa H, Makino K, Amemura M, Nakata A. Journal of Bacteriology 1987;169(12):5429–5433.
- Broad Institute. "CRISPR Timeline." broadinstitute.org
- Jinek M, Chylinski K, Fonfara I, Hauer M, Doudna JA, Charpentier E. "A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity." Science 2012;337(6096):816–821.
- Gasiunas G, Barrangou R, Horvath P, Šikšnys V. PNAS 2012;109:E2579–E2586.
- Cong L, și colaboratorii. Science 2013;339(6121):819–823; Mali P, și colaboratorii. Science 2013;339(6121):823–826. Ambele la 3 ianuarie 2013.
- AAAS. "Science selects CRISPR genome-editing tool as 2015 Breakthrough of the Year." 18 decembrie 2015. aaas.org
- The Nobel Prize in Chemistry 2020. nobelprize.org
- Vertex Pharmaceuticals / CRISPR Therapeutics. Anunțurile MHRA (16 noiembrie 2023), FDA (8 decembrie 2023 și 16 ianuarie 2024), Comisiei Europene (13 februarie 2024) și extinderea vârstei FDA (1 iulie 2026).
- Vertex Pharmaceuticals. Rezultatele studiilor pivot CLIMB-121 și CLIMB-111, data-limită EHA 2023.
- European Medicines Agency. Casgevy EPAR. ema.europa.eu
- Stadtmauer EA, June CH, și colaboratorii. "CRISPR-engineered T cells in patients with refractory cancer." Science 2020. doi:10.1126/science.aba7365
- CRISPR Therapeutics. Datele CTX112 faza 1, ASH 2024; anunț RMAT la 9 decembrie 2024.
- Anzalone AV, și colaboratorii. Prime editing. Nature 2019.
- Penn Medicine și Children's Hospital of Philadelphia. Anunțurile cazului KJ Muldoon; New England Journal of Medicine, 15 mai 2025.
- Haapaniemi E, Botla S, Persson J, Schmierer B, Taipale J. "CRISPR–Cas9 genome editing induces a p53-mediated DNA damage response." Nature Medicine 2018;24(7).
- Kosicki M, Tomberg K, Bradley A. "Repair of double-strand breaks induced by CRISPR–Cas9 leads to large deletions and complex rearrangements." Nature Biotechnology 2018;36:765–771.
- "Chromothripsis as an on-target consequence of CRISPR–Cas9 genome editing." Nature Genetics 2021.
- Excision BioTherapeutics. Rezultate intermediare EBT-101 faza 1/2, ASGCT, mai 2024.
- "WRN helicase is a synthetic lethal target in microsatellite unstable cancers." Nature 2019.
- United States Court of Appeals for the Federal Circuit, decizia 22-1653, 12 mai 2025.
Surse
CRISPR-Cas systems for editing, regulating and targeting genomes.
Nature Biotechnology 32, 347–355 (2014)
2. Chen Liang, Mark A. Wainberg, Atze T. Das and Ben Berkhout.
CRISPR/Cas9: a double-edged sword when used to combat HIV infection.
Retrovirology 2016.
3. Rafal Kaminski, Yilan Chen, Tracy Fischer, Ellen Tedaldi, Alessandro Napoli, Yonggang Zhang, Jonathan Karn, Wenhui Hu & Kamel Khalili.
Elimination of HIV-1 Genomes from Human T-lymphoid Cells by CRISPR/Cas9 Gene Editing.
Scientific Reports 6, Article number: 22555 (2016)
Ți-a fost util acest articol?
Feedbackul tău ne ajută să îmbunătățim conținutul.
Comentariile cititorilor
Împărtășește comentariul tău
Numele și comentariul dumneavoastră sunt publicate numai după aprobarea administratorului. Adresa de e-mail nu este afișată niciodată vizitatorilor.
Fii primul care comentează.