Mergi la conținut
Prof. Dr. Mustafa Özdoğan · Medic oncolog

Cum arată căutarea unui virus în interiorul unei celule tumorale? Epstein, Barr, Achong și limfomul Burkitt (1964)

Cum arată căutarea unui virus în interiorul unei celule tumorale? Epstein, Barr, Achong și limfomul Burkitt (1964)
În acest articol

Cum arată căutarea unui virus în interiorul unei celule tumorale? Epstein, Barr, Achong și limfomul Burkitt (1964)

Perioada: 1961-1968
Locul: Londra (Spitalul Middlesex); Philadelphia (Spitalul de Copii)

Ieri am urmărit obiceiul unei țări întregi (ziua 139); astăzi privim în interiorul unei singure celule tumorale. În ziua 136 am desenat harta Africii a lui Denis Burkitt: o tumoare a maxilarului la copii se aduna de-a lungul centurii malariei. Corespondentul celular al hărții a apărut la Londra sub un microscop electronic. În ziua 97, vorbind despre virusul sarcomului de pui al lui Rous, am spus „majoritatea cancerelor nu sunt virale"; povestea de azi nu strică această frază, îi arată limitele.

— O conferință și doi ani de căutare zadarnică —

Martie 1961: o conferință la Spitalul Middlesex

Potrivit articolului Cancer Research UK din 2014, Burkitt a ținut o conferință la Londra pe 22 martie 1961, iar printre ascultători se afla Anthony Epstein. Cuvântarea comemorativă a lui Rickinson și articolul Universității din Bristol din 2024 dau ca loc Spitalul Middlesex; Burkitt era chirurg într-un spital misionar din Uganda și a descris această tumoare la copiii din Africa tropicală. Potrivit Wikipedia, Epstein lucra atunci la virusuri care provoacă cancer la păsări și și-a mutat cercetarea spre căutarea unei origini virale a tumorii Burkitt (o continuare a liniei Rous din ziua 97). Potrivit lui Gruffat și Manet, Epstein a presupus că tumoarea ar putea fi provocată de un virus transmis prin insecte.

Experiența cu microscopia electronică o dobândise, după Rickinson, în timpul unui an sabatic la Institutul Rockefeller din New York. Articolul din Bristol spune că Epstein a căutat aproximativ doi ani un virus în probele tumorale împreună cu Yvonne Barr, doctorandă nou angajată, fără niciun rezultat; Rickinson spune și el că primele rezultate cu probe africane au fost negative.

Decembrie 1963: ceață și o eprubetă tulbure

Potrivit povestirii, o probă de biopsie trimisă cu avionul de la Kampala a fost redirecționată la Manchester din cauza ceții (Bristol, Gruffat și Manet). La Londra lichidul de conservare arăta tulbure, ceea ce de obicei semnalează o contaminare bacteriană. Privind la microscop, Epstein a văzut că tulburarea nu era contaminare, ci celule desprinse din tumoare. După Gruffat și Manet, aceasta l-a dus la cultura în suspensie, care a funcționat acolo unde cultura în plăci eșuase; în cuvintele CRUK, călătoria lungă desprinsese unele celule tumorale. Rickinson scrie că în decembrie 1963, după aproximativ doi ani de muncă, o tumoare a dat o linie celulară capabilă să crească în cultură, numită „EB1" după Epstein și Barr.

În privința datei, sursele nu se potrivesc: Wikipedia plasează descoperirea în februarie 1964, iar Gruffat și Manet plasează ceața în decembrie 1963 și suficiente celule pentru microscopia electronică la câteva săptămâni după aceea. În grafic am desenat decembrie 1963 cu un marcaj galben, pentru a arăta contradicția.

Martie 1964 — The Lancet

„Virus particles in cultured lymphoblasts from Burkitt's lymphoma"

Scurta notă a lui Epstein, Achong și Barr a apărut în volumul 1 din The Lancet, paginile 702-703 (aceasta este ordinea autorilor: Epstein, Achong, Barr). Înregistrarea din Garrison-Morton spune că lucrarea raporta „particule virale asemănătoare celor de herpes" în celule din tumoarea Burkitt. Potrivit lui Rickinson, Epstein a văzut în celulele EB1 particule asemănătoare herpesvirusurilor, dar doar o mică parte din celule era infectată. Articolul din Bristol spune că descoperirea a fost raportată în The Lancet la trei ani și o săptămână după conferință.

Nu am citit textul notei din Lancet. Limitele vin din lucrarea detaliată a aceleiași echipe din Journal of Experimental Medicine, publicată la 1 mai 1965 (121(5):761-770): ambele linii, EB1 și EB2, din două biopsii diferite, conțineau un virus cu același aspect; se vedea în aproximativ 1-2% din celule, sub formă de particule imature (circa 75 mµ) și mature (110-115 mµ); autorii menționează „un indiciu" că particulele se maturizează prin înmugurire prin membrana celulară. Toate încercările de a izola și identifica virusul au eșuat, iar autorii îl descriu ca „necunoscut, neidentificat". La embrioni de pui, hamsteri și șoareci nou-născuți și în nouă sisteme de culturi de țesut nu s-a văzut niciun efect detectabil.

Infecția latentă

Un virus poate sta ani întregi tăcut într-o celulă, fără să se înmulțească și, adesea, fără să provoace boală (infecție întârziată sau latentă; definiție simplificată). Potrivit lui Rickinson, metodele moleculare au arătat genomul EBV ca infecție latentă în fiecare limfom Burkitt african examinat. Faptul că particulele se vedeau în 1-2% din celule nu exclude deci că genomul se află tăcut în majoritatea celorlalte.

Rivali, un „virus necunoscut" și serologia de la Philadelphia

În 1964 echipa lui Epstein nu era singură în acest domeniu. Potrivit listei de referințe a articolului din JEM, Dalldorf și Bergamini au raportat agenți filtrabili neidentificați din limfoame maligne la copii africani; Bell și colaboratorii au scris că au izolat un reovirus dintr-un caz Burkitt; iar Epstein, Woodall și Thomson au raportat limfom limfoblastic la maimuțe verzi africane cărora li se dăduse material de biopsie Burkitt. Nu am citit niciuna dintre aceste publicații; transmit doar referințele din listă. Așadar, „în tumoarea Burkitt s-a găsit un virus" nu avea în 1964 un singur răspuns corect; ce deosebea echipa lui Epstein erau particulele văzute într-o linie celulară, iar ce erau ele rămânea necunoscut.

După Gruffat și Manet, Gertrude și Werner Henle de la Spitalul de Copii din Philadelphia au folosit serurile pacienților împotriva herpesvirusurilor umane cunoscute pentru a arăta că noul virus este diferit de ele și l-au denumit după linia EB1. Și Rickinson scrie că echipa Henle a arătat că virusul este distinct de cele trei herpesvirusuri umane cunoscute și a propus numele „virusul EB"; niciunul nu dă data denumirii. CRUK spune că în 1965 a fost numit oficial EBV, dar articolul din JEM din același an încă numește virusul „necunoscut"; am lăsat această contradicție în caseta de verificare a faptelor.

În 1968, Henle, Henle și Volker Diehl au publicat în Proceedings of the National Academy of Sciences (59:94-101) relația dintre virusul de tip herpes asociat tumorii Burkitt și mononucleoza infecțioasă; înregistrarea Garrison-Morton rezumă aceasta ca dovada că EBV provoacă mononucleoza. După Gruffat și Manet, lucrul s-a văzut când un angajat de laborator neinfectat până atunci s-a îmbolnăvit și a seroconvertit.

A vedea o particulă virală nu înseamnă a arăta o cauză; un virus pe care îl poartă toți nu este cauza fiecărui cancer

Prima limită: în 1964 s-au obținut particule văzute în 1-2% din celulele unor linii celulare cultivate. Despre un virus care nu a putut fi izolat, nu a putut fi identificat și nu a avut niciun efect la animale (JEM 1965) nu se poate spune că e cauza tumorii; în acel stadiu era arătat „există un virus", nu „aceasta este cauza tumorii" (lectura mea). A doua limită, efectul relativ și cel absolut citite împreună: CRUK scrie că aproximativ 9 din 10 adulți din America sunt seropozitivi pentru EBV; într-un studiu din Yozgat pe 2.323 de persoane, cu EBV VCA IgG (autorul și anul nu sunt date pe pagina de catalog), seropozitivitatea generală a fost de 82,2%. Deci întâlnirea cu virusul este obișnuită pentru aproape toți, iar limfomul Burkitt este rar; incidența absolută a limfomului Burkitt nu am găsit-o în sursele citite.

A treia limită, virusul singur nu este suficient: CRUK scrie că gene, alimentație și alte infecții au și ele un rol; descoperirea la Institutul Karolinska, în 1976, a unei modificări cromozomiale care implică gena c-myc face și ea parte din poveste (CRUK; se leagă de linia translocației din ziua 137). A patra limită, denumirea și munca: virusul poartă numele a doi dintre cei trei. Bert Achong (1928-1996) a ajutat la microscopia electronică, iar Barr (1932-2016) este numită în surse „asistentă de cercetare" (Rickinson, Gruffat și Manet) sau „doctorandă" (Bristol); nu am putut rezolva contradicția. A cincea limită, vaccinul: Rickinson scrie că Epstein a lucrat din anii 1970 la un vaccin EBV și că mari companii farmaceutice testează candidați de vaccin în studii clinice; sursele acestui articol nu menționează un vaccin EBV aprobat.

Ce a rămas
  • Cultivarea unei linii celulare tumorale în suspensie și examinarea ei la microscopul electronic
  • Folosirea serologiei pentru a distinge noul virus de cele cunoscute (Henle)
  • Legătura virusului și cu mononucleoza infecțioasă: nu doar un „virus al unei tumori africane"
Ce a căzut sau a fost limitat
  • Formula „virus necunoscut, neidentificat" (denumit după 1965)
  • Considerarea vederii unei particule drept dovadă a unei cauze
  • Legarea limfomului Burkitt doar de virus: sunt menționați și alți factori
Raportul lui Burkitt (1958)Conferința lui Burkitt la Londra (mar 1961)Ceața și linia EB1 (dec 1963; surse contradictorii)Articolul din Lancet (mar 1964)Articolul din JEM (1 mai 1965)Henle și Diehl, mononucleoză (1968)Genomul EBV în cancerul nazofaringian (1973)19551960196519701975datele cunoscute doar ca an sunt la mijlocul anului, cele doar cu luna la mijlocul lunii; axa: an

Drumul spre descoperirea virusului Epstein-Barr: din 1958 până în 1973. Axa merge de la 1955 la 1975. Marcajele verzi sunt date găsite în mai multe surse sau în înregistrări cu referințe verificate (martie 1961, martie 1964, 1 mai 1965, 1968); marcajul galben este o dată în care sursele se contrazic (decembrie 1963 față de februarie 1964); marcajele albastre provin dintr-o singură sursă secundară sau doar din an. Datele cunoscute doar ca an sunt desenate la mijlocul anului, cele cunoscute doar ca lună, la mijlocul lunii.

— Perspectiva Turciei —

O măsurătoare de seroprevalență din Yozgat

Sursele mele nu arată pentru 1964 nicio legătură locală a Turciei cu această descoperire și nu inventez una. Există un punct de date verificabil: la Yozgat, seroprevalența EBV VCA IgG a fost măsurată prin ELISA la 2.323 de persoane cu vârste între 6 luni și 96 de ani; seropozitivitatea generală a fost de 82,2%, de 60,2% la 6 luni-2 ani, 70,2% la 3-5 ani, 89,9% la 20-29 de ani; 85,5% la femei și 79,1% la bărbați. Pozitivitatea a crescut cu numărul de frați; locuința, venitul, locul de reședință și frecventarea creșei nu au fost asociate cu ea (doar rezumatul unui catalog de teze; autorul și anul nu sunt pe pagină, textul integral nu l-am citit). Deducția mea: întâlnirea timpurie cu virusul este foarte frecventă și în Turcia, iar legătura EBV cu cancerul trebuie citită ca urmarea rară a unei infecții comune.

— Cronologie —

Din 1958 până astăzi

1958
Burkitt. Raportează cancerul copilăriei (CRUK; ziua 136).
22 mar 1961
Londra. Conferința lui Burkitt; Epstein ascultă (CRUK; martie 1961 în mai multe surse, ziua doar la CRUK).
1961-1963
Doi ani de căutare. Împreună cu Barr se caută un virus în probele tumorale; rezultatul e negativ (Bristol, Rickinson).
dec 1963
Ceața. O probă redirecționată la Manchester, linia celulară EB1 (Rickinson, Gruffat și Manet; Wikipedia spune februarie 1964).
mar 1964
The Lancet. Epstein, Achong și Barr; 1:702-703.
1964
Alte raportări. Dalldorf-Bergamini, Bell și colaboratorii, Epstein-Woodall-Thomson (referințe din JEM).
1 mai 1965
JEM. Epstein, Henle, Achong și Barr; virusul este „necunoscut, neidentificat".
1968
Henle și Diehl. EBV și mononucleoza infecțioasă (PNAS 59:94-101).
1973
Nazofaringe. Genomul EBV în celulele canceroase epiteliale (Wolf, zur Hausen, Becker; după Lamelin și colab.).
1976, 1991, 2009
Pașii următori. Modificare cromozomială care implică c-myc (1976); EBV într-un tip rar de cancer gastric (1991); EBV în aproximativ unul din zece cancere gastrice (analiză din 2009) (CRUK).
AZI — ZIUA 140
Ce se poate spune. Vederea particulelor virale într-o linie celulară tumorală nu a dovedit cauza; dovada s-a strâns de-a lungul deceniilor, odată cu serologia, legătura cu mononucleoza și metodele moleculare.
— Note de verificare a faptelor —

Ce este verificat, ce se contrazice

  • Limita lecturii: Nu am citit textul notei din Lancet; doar referința ei (înregistrarea Garrison-Morton: Epstein, Achong, Barr; Lancet 1:702-3, 1964) și relatări secundare. Din lucrarea JEM 1965 (PMC) am citit doar rezumatul paginii. Toate celelalte informații provin de la CRUK (2014), Universitatea din Bristol (2024), cuvântarea comemorativă a lui Rickinson (fără dată), Gruffat și Manet (médecine/sciences 2024; în franceză) și EA4HP (2021).
  • Data din Lancet: CRUK spune „martie 1964". În bibliografia lui Gruffat și Manet numărul apare ca „15"; ar putea fi ziua, nu am putut verifica. „Trei ani și o săptămână mai târziu" (Bristol) citit împreună cu 22 martie 1961 dă 28 martie 1964, dar aceasta este deducția mea; în text am scris doar „martie 1964".
  • Data descoperirii: Rickinson și Gruffat-Manet descriu ceața și linia celulară în decembrie 1963; Wikipedia plasează descoperirea în februarie 1964. Arătat cu marcaj galben.
  • Povestea ceții: Redirecționarea biopsiei din Kampala spre Manchester apare la Bristol, CRUK și Gruffat-Manet; detaliile variază, am scris nucleul comun.
  • Rolul lui Barr: Bristol spune „doctorandă", Rickinson și Gruffat-Manet „asistentă de cercetare", Wikipedia atât studentă, cât și co-descoperitoare. Nerezolvat.
  • Afirmația „primul virus tumoral uman": CRUK și Rickinson numesc EBV „primul virus tumoral uman"; Garrison-Morton „primul virus uman al cancerului". Formularea „necunoscut, neidentificat" din JEM 1965 și eșecul izolării slăbesc afirmația pentru 1964. Nu am adoptat aici afirmația „primul"; raportările rivale (reovirusul lui Bell, Dalldorf-Bergamini) au fost luate doar din referințele JEM și nu au fost citite.
  • Denumirea: CRUK spune „în 1965 oficial EBV"; Gruffat-Manet și Rickinson scriu că Henle l-au denumit, fără dată. Articolul JEM din același an (mai 1965) lasă virusul fără nume.
  • Conferința lui Burkitt: martie 1961 și Spitalul Middlesex apar în mai multe surse; 22 martie doar la CRUK.
  • Datele din Yozgat: autorul, anul și universitatea nu sunt pe pagina de catalog; titlul și cifrele provin de acolo.
  • Viața lui Epstein: născut la 18 mai 1921, a încetat din viață la 6 februarie 2024, la 102 ani (Wikipedia; Bristol scrie că vestea a fost anunțată la 21 februarie 2024). Membru al Royal Society din 1979 și cavaler din 1991 după Gruffat-Manet.
  • c-myc 1976, cancer gastric 1991 și 2009: doar de la CRUK; detaliile nu au fost citite.
Mâine — ziua 141

De ce încetează o bacterie să se dividă?

Astăzi am căutat un virus într-o celulă tumorală; mâine mergem la un medicament anticancer născut din bacterii care au încetat să se dividă într-un câmp electric. Începutul anilor 1960, Universitatea de Stat din Michigan: electrozi de platină și Barnett Rosenberg. Vă amintiți că în ziua 96 am descris ideea de „glonț magic" a lui Ehrlich; mâine vom vedea cum a renăscut această idee dintr-o sursă neașteptată. Numele, datele și detaliile le voi verifica mâine.

Nota autorului: Calea ușoară pentru acest articol ar fi fost să spun „Epstein a dovedit primul virus uman al cancerului". Ce s-a arătat în 1964 au fost particule văzute într-o linie celulară în proporție de 1-2%, care nu au putut fi izolate sau identificate; în cuvintele autorilor înșiși, virusul era „necunoscut". Majoritatea adulților poartă virusul, iar cancerul este rar; de aceea serologia și lucrările moleculare din deceniile următoare au purtat greutatea reală a dovezii. Nota din Lancet nu am citit-o; am scris acest lucru în caseta de verificare a faptelor.

Surse și lecturi suplimentare

  1. Epstein MA, Achong BG, Barr YM. Virus particles in cultured lymphoblasts from Burkitt's lymphoma. Lancet 1964;1:702-703 (referință din înregistrarea Garrison-Morton; textul nu a fost citit).
  2. Epstein MA, Henle G, Achong BG, Barr YM. Morphological and biological studies on a virus in cultured lymphoblasts from Burkitt's lymphoma. J Exp Med 1965;121(5):761-770. doi:10.1084/jem.121.5.761. PMID 14278230 (rezumatul paginii PMC citit).
  3. Henle G, Henle W, Diehl V. Relation of Burkitt's tumor-associated herpes-type virus to infectious mononucleosis. Proc Natl Acad Sci USA 1968;59:94-101 (înregistrarea Garrison-Morton citită).
  4. Cancer Research UK. 50 years of Epstein-Barr virus. Emma Smith, 26 martie 2014 (citit).
  5. Universitatea din Bristol. Professor Sir Anthony Epstein CBE FRS, 1921-2024. Februarie 2024 (citit).
  6. Rickinson A. Sir Anthony Epstein FRS: cuvântare la dezvelirea plăcii albastre din Oxford, oxonblueplaques.org.uk (fără dată; citit).
  7. Gruffat H, Manet E. Sir Anthony Epstein (1921-2024): le découvreur du virus d'Epstein-Barr. médecine/sciences 2024;40(8-9):665-669 (în franceză; citit).
  8. EA4HP. Prof. Sir Anthony Epstein, born on May 18th 1921. european-association-for-haematopathology.org, 11 mai 2021 (citit).
  9. Yozgat ilinde farklı yaş gruplarında Epstein-Barr virüs immünglobulin G seroprevalansının belirlenmesi (Determinarea seroprevalenței imunoglobulinei G pentru virusul Epstein-Barr în diferite grupe de vârstă în provincia Yozgat). Açık Bilim (YÖK), înregistrare din catalogul de teze (rezumat citit; fără autor și an).
  10. Mukherjee S. The Emperor of All Maladies: A Biography of Cancer. New York: Scribner, 2010 (context general; capitolul relevant nu a fost citit în această sesiune).

Acest articol este ziua 140 din seria „365 de zile de istorie a cancerului" și povestește descoperirea virusului Epstein-Barr ca eveniment istoric. Este conținut istoric-popular, nu diagnostic sau recomandare de tratament. Pentru decizii privind infecțiile, analizele de sânge și sănătatea dumneavoastră, consultați medicul. Sursele sunt verificate; detaliile care se sprijină doar pe o sursă secundară sau care nu au putut fi citite sunt marcate în notele de verificare a faptelor.

IA DROZDOGAN

Să explorăm acest articol împreună

Pune întrebări despre articol și citește răspunsurile alături de sursele publicate pe site.

IA DROZDOGAN

Asistentul Drozdogan

Cum arată căutarea unui virus în interiorul unei celule tumorale? Epstein, Barr, Achong și limfomul Burkitt (1964)

Pune întrebări despre articol și citește răspunsurile alături de sursele publicate pe site.

Informații despre conversație și confidențialitate

Asistentul Drozdogan răspunde în această conversație. Administratorii autorizați o pot verifica pentru calitate. Nu divulga informații personale.

Răspunsurile folosesc infrastructura OpenAI. Întrebările și răspunsurile sunt prelucrate de acel serviciu; conversațiile sunt stocate pe site-ul nostru. Nu divulga date de identificare, de contact sau informații personale de sănătate.

0 / 1000

Doar pentru informare; fără diagnostic personal sau recomandări de tratament.

Articole conexe

Explorează alte articole despre acest subiect.

Rămâi informat

Primește articole noi și noutăți științifice prin email.

Google Analytics funcționează pe paginile publice independent de această fereastră și poate utiliza cookie-uri analitice. Alegerea de aici controlează doar serviciile externe.